5×Taq One-Step RT-PCR Mix
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- 5×Taq One-Step RT-PCR Mix为经过独特工艺优化的新型反应体系，含有RT-PCR扩增所需要的缓冲液、逆转录酶、RTS Taq DNA聚合酶、dNTP及镁离子等组分，使用本产品不需要前期进行核酸处理，只需添加引物和探针就可以进行扩增实验，降低污染风险。本缓冲液使用TRICINE作为缓冲液进行配制，采用独特工艺技术，有效缩短退火时间，可以进行快速PCR扩增。
储存条件：
常温运输7天，2-8℃保存1月，-20℃保存3年。
产品内容：
名称 | 规格 | 备注 | |
RTS MMLV逆转录酶(200U/μl) | 1.0mL/管 | 25mL/瓶 | — |
运输条件 | 常温 | — | |
储存条件 | 2-8℃保存1月， -20℃保存3年 | — | |
使用方法：
1. PCR反应体系设置(以25μl反应体系为例)
组分 | 使用量(微升) | 备注 |
5×RT-PCR buffer | 5.0 | 各组分使用量可根据PCR扩增体系的变化而调整 |
dNTP(10mM) | 0.50 | |
正向引物（40μM） | 0.25 | |
反向引物（40μM） | 0.25 | |
探针（4μM） | 0.15 | |
RTS MMLV逆转录酶(200U/μl) | 0.40 | |
RTS-Taq DNA聚合酶（2.5U/μl） | 1.0 | |
无核酸酶水 | 7.45 | |
Template DNA | 10.0 |
2. PCR扩增条件设置
以100-300bp大小扩增片段为例
步骤 | 温度 | 时间 | 循环 |
1 | 50℃ | 5-15 min | 1 |
2 | 95℃ | 2 min | 1 |
3 | 95℃ | 5s | 40※ |
4 | 55-60℃ | 10-30s（采集荧光） |
※注：反应条件根据引物探针和模板情况可自行设置。